Escollir el material de cultiu adequat és crucial per garantir un creixement cel·lular òptim i resultats experimentals. Quan escolliu vasos de cultiu cel·lular, és important tenir en compte factors com el tipus de cèl·lula, la finalitat específica del vostre cultiu, l'escala del cultiu, el tipus de medi de cultiu, els materials i la mida dels vasos, els tractaments superficials, les tapes intercanvi de gasos, i la seva compatibilitat amb el vostre equip de laboratori.
Aquests són els factors clau a tenir en compte a l'hora de seleccionar el recipient de cultiu cel·lular adequat
1. Trieu el recipient de cultiu cel·lular segons el tipus de cèl·lules
Cèl·lules adherents
Aquestes cèl·lules necessiten una superfície per unir-se i estendre's. Per a cèl·lules adherides, necessitareu vasos amb una superfície que proporcioni prou espai per a la fixació i el creixement de les cèl·lules.
Exemples Matrassos tractats amb cultiu de teixits, plaques de Petri i plaques de diversos pous.
Cèl·lules de suspensió
Aquestes cèl·lules creixen flotant en el medi, de manera que no es considera una superfície.
2. Trieu el recipient de cultiu cel·lular segons la mida (capacitat de volum)
Cultures a petita escala
Per a experiments a petita escala o cribratge d'alt rendiment, els vaixells més petits són ideals.
Exemples Plaques de diversos pous (plaques de cultiu de 6, 24, 96 cèl·lules),
Plaques de Petri, o matràs T25.
Cultures a gran escala
Si necessiteu fer créixer grans quantitats de cèl·lules, els vasos més grans o els bioreactors són millors.
Exemples de matrassos de cultiu cel·lular T75 i T175, bioreactors o matrassos giratoris per a cultius de cèl·lules en suspensió.
3. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció del tractament superficial
Superfícies tractades amb cultiu de teixits
Els vasos es tracten prèviament per promoure la fixació cel·lular, cosa que els fa adequats per als tipus de cèl·lules adherents. Aquests estan generalment recoberts de substàncies com col·lagen, fibronectina o altres components de la matriu extracel·lular.
Superfícies no tractades
Ideal per a cultius en suspensió o quan les cèl·lules no necessiten adherir-se a la superfície. Normalment s'utilitzen per a cèl·lules que creixen lliurement al medi.
4. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció del material
Poliestirè utilitzat habitualment per a aplicacions estàndard de cultiu cel·lular. És clar, permet una inspecció visual fàcil i funciona bé tant per a cèl·lules adherides com en suspensió.
El policarbonat o el polipropilè s'utilitzen per a determinades aplicacions de bioreactors i per a recipients que requereixen més flexibilitat o tractaments superficials específics.
Vidre utilitzat per al cultiu estàndard de teixits a causa del cost i la trencabilitat, els recipients de vidre poden ser adequats per a aplicacions específiques o cultius a gran escala.
Flascons
Per al cultiu cel·lular general, s'utilitzen habitualment matràs en T (T25, T75, T150). La superfície plana proporciona una bona zona per a la fixació i el creixement cel·lular. Es poden utilitzar tant per a cèl·lules adherides com per a cultius en suspensió si es mantenen les condicions adequades.
Plaques de Petri
Comú per a cultius a petita escala i per a experiments que requereixen observació, com ara assajos de formació de colònies.
Plaques Multi-Pots
Són útils per a la detecció d'alt rendiment i experiments a menor escala. Plaques amb 6, 12, 24, 48,
96, o 384 pous disponibles, i són ideals per a assaigs basats en cèl·lules, alliberament de citocines, proves de fàrmacs i altres aplicacions d'alt rendiment.
Flascons giratoris
S'utilitza per a cultius de cèl·lules en suspensió, especialment en volums més grans on és necessària una agitació controlada per mantenir el creixement cel·lular i evitar l'aglomeració cel·lular.
Bioreactors
Per al cultiu de suspensió a gran escala, els bioreactors permeten un control més complex de les condicions ambientals (p. ex., pH, temperatura, oxigenació) i s'utilitzen per a la producció de grans volums, com en la fabricació biofarmacèutica.
6. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció de l'esterilitat i la ventilació
Esterilitat
Assegureu-vos que el recipient és estèril o ha estat esterilitzat per evitar la contaminació. La majoria dels recipients de cultiu comercials estan esterilitzats prèviament, però sempre comproveu l'embalatge.
Ventilació
Alguns recipients, com ara els matrassos, vénen amb taps o filtres ventilats per permetre l'intercanvi d'aire i evitar la contaminació. Això és essencial quan es cultiven cèl·lules en condicions d'alta densitat.
7. Trieu el recipient de cultiu cel·lular segons la conveniència d'ús
Autoclavable vs. d'un sol ús
Alguns recipients de cultiu es poden autoclau per reutilitzar (per exemple, ampolles de vidre, certs flascons de plàstic), mentre que altres són d'un sol ús i d'un sol ús (per exemple, plaques de Petri de plàstic, plaques de diversos pous).
Manipulació i transport
Tingueu en compte la facilitat de transferir cèl·lules entre vasos. Per exemple, les plaques de diversos pous poden requerir plaques especialitzades per a un fàcil maneig amb equips com ara pipetes automatitzades.
8. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció del volum del medi de cultiu
Trieu un recipient que pugui acomodar el volum desitjat de medi de cultiu sense malgastar recursos. Si es treballa amb un cultiu de gran volum, poden ser necessaris flascons o bioreactors més grans, mentre que els volums més petits són adequats per a plats o plaques de cultiu cel·lular.
9. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció de consideracions de cost
Un sol ús vs. reutilitzable
Els recipients de plàstic d'un sol ús són rendibles i redueixen el risc de contaminació, però poden ser cars per a operacions a gran escala. Els recipients de vidre reutilitzables tenen un cost inicial més elevat, però es poden esterilitzar i reutilitzar diverses vegades, cosa que els fa més econòmics per a un ús a llarg termini.
Eficiència de volum
Assegureu-vos que la mida del recipient sigui adequada per evitar el malbaratament de materials, especialment quan s'utilitzen medis de creixement o reactius cars.
10. Trieu el recipient de cultiu cel·lular en funció dels requisits específics de l'aplicació
Imatge
Si necessiteu visualitzar cèl·lules sota un microscopi, trieu vasos amb materials òpticament clars i dimensions adequades per a la vostra configuració d'imatge (p. ex., plaques de diversos pous per a la detecció d'alt contingut o plats amb fons de vidre per a imatges de cèl·lules vives).
Agitació controlada
Per als cultius de cèl·lules en suspensió, considereu els flascons giratoris o els bioreactors que proporcionen una agitació controlada per mantenir les cèl·lules suspeses uniformement.
Conclusió
Escollir el recipient de cultiu cel·lular adequat requereix equilibrar diversos factors, com ara el tipus cel·lular, l'escala de cultiu, la compatibilitat del material i les necessitats experimentals específiques. Les cèl·lules adherides requeriran superfícies que afavoreixin la fixació, mentre que les cèl·lules en suspensió es beneficien de volums i agitació més grans. Per a treballs a petita escala, poden ser suficients plaques multipous o matràs en T, mentre que els cultius més grans poden requerir matrassos giratoris o bioreactors. Assegureu-vos sempre que els vaixells compleixin els vostres requisits d'esterilitat i manipulació, i tingueu en compte la rendibilitat en funció del vostre ús.
Tenint en compte aquests factors, podeu seleccionar el recipient òptim que proporcioni les condicions adequades per al vostre cultiu cel·lular i els vostres objectius experimentals.